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猪脂联素(ADPN)elisa试剂盒

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猪脂联素(ADPN)elisa试剂盒

猪脂联素(ADPN)ELISA试剂盒主要用于定量检测猪生物样本中脂联素的浓度,其核心应用及技术规范如下:


🔬 一、核心应用方向

  1. ‌代谢性疾病研究‌
    定量检测血清、血浆中的脂联素水平,评估其在猪肥胖、胰岛素抵抗及脂肪肝等代谢性疾病中的作用机制,尤其关注脂联素对糖脂代谢的调控功能‌13。

  2. ‌炎症调控机制分析‌
    通过检测组织匀浆(如肝脏、脂肪组织)中的脂联素浓度,探究其通过抑制NLRP3炎症小体活化减轻肝脏炎症反应及细胞焦亡的作用路径(如改善代谢功能障碍相关脂肪性肝炎)‌1。

  3. ‌肾脏与心血管关联研究‌
    联合尿液样本检测,探索脂联素在猪慢性肾病或动脉粥样硬化中的保护性作用‌36。


⚙️ 二、检测技术规范

‌参数‌‌要求说明‌
‌检测原理‌‌双抗体夹心ELISA法‌:预包被抗体捕获ADPN → HRP标记二抗结合 → TMB显色(450nm读数)‌23
‌适用样本‌血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、组织匀浆(如肝脏、脂肪)、尿液、细胞培养上清液‌23
‌灵敏度范围‌典型检测限0.094 ng/mL,线性范围0.156–10 ng/mL(不同品牌略有差异)‌25
‌样本保存‌▶ 短期存于2-8℃(≤48小时),长期需-20℃分装避光保存;
▶ 反复冻融≤3次‌38

⚠️ 三、关键操作注意事项

  1. ‌样本预处理‌

    • ‌血清/血浆‌:3000×g离心15-30分钟去除纤维蛋白或细胞碎片,避免溶血/脂血干扰‌38;

    • ‌组织匀浆‌:按1:9(重量/体积比)加入预冷PBS(含蛋白酶抑制剂)冰上研磨,离心取上清‌36。

  2. ‌实验干扰控制‌

    • 含NaN<sub>3</sub>的抗凝剂会抑制HRP活性,需替换为无抑制成分抗凝剂‌8;

    • 显色终止后需在15分钟内完成OD值检测‌8。

  3. ‌应用限制‌

    • ‌仅限科研用途‌,不可用于临床诊断或兽医诊疗‌23;

    • 跨物种检测需验证抗体特异性(如兔、鼠可能存在交叉反应)‌6。


💡 四、优化建议

  • ‌联合指标设计‌:同步检测胰岛素、CRP或IL-6等指标,增强代谢-炎症轴机制的解释力‌14;

  • ‌动态监测‌:在肥胖或脂肪肝模型中连续采集多时间点样本,分析脂联素浓度变化趋势‌1;

  • ‌质控要求‌:标准曲线R²值需≥0.98,样本复孔板内变异系数(CV)应<15%‌58。

‌注‌:具体操作参数(如温育时间、洗涤次数)需以试剂盒说明书为准‌35。


代谢-炎症调控机制示意图(基于‌1研究)

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A[脂肪组织释放ADPN] --> B[抑制肝脏NLRP3炎症小体活化]
B --> C[减少IL-1β/IL-18释放]
C --> D[减轻肝细胞焦亡]
D --> E[改善代谢功能障碍相关脂肪性肝炎]


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