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绵羊铁调素(Hepcidin)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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绵羊铁调素(Hepcidin)elisa试剂盒

以下是绵羊铁调素(Hepcidin)ELISA试剂盒的核心应用与技术规范总结:


‌一、核心应用方向‌

  1. ‌铁代谢调控研究‌

    • 定量检测血清、血浆或肝组织匀浆中的Hepcidin水平,评估其在铁稳态中的作用(Hepcidin通过抑制肠道铁吸收和巨噬细胞铁释放维持铁平衡)24;

    • 分析炎症或感染状态下Hepcidin异常升高与功能性缺铁的关联(如细菌感染后Hepcidin上调导致血清铁降低)48。

  2. ‌营养与繁殖生理监测‌

    • 探究妊娠期/哺乳期绵羊Hepcidin动态变化,揭示铁需求增长与Hepcidin抑制的调控关系89;

    • 结合铁代谢指标(血清铁、转铁蛋白饱和度),诊断绵羊缺铁性贫血或慢性病性贫血48。

  3. ‌肉质保鲜机制研究‌

    • 检测屠宰后肌肉组织Hepcidin水平,分析其与线粒体功能、脂质氧化进程的相关性(影响羊肉贮藏期品质)9。


‌二、试剂盒技术规范‌

‌参数‌‌要求/说明‌
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:预包被抗体捕获Hepcidin→生物素标记二抗结合→HRP-链霉亲和素→TMB显色定量(450 nm)89
‌检测范围‌‌绵羊专用数据未明确‌(参考鼠/人试剂盒:0.78–50 ng/mL或1.56–100 ng/mL)67
‌样本兼容性‌‌血清/血浆‌:无溶血,3000×g离心分离(EDTA/肝素抗凝)89;
‌组织匀浆‌:PBS 1:9匀浆离心取上清89;
‌细胞上清液‌:直接检测3
‌保存要求‌样本-20℃分装(冻融≤3次);未开封试剂盒2–8℃避光保存(保质期6个月)28

‌操作关键点‌:

  • ‌显色控制‌:TMB显色终止后15分钟内完成450 nm读数(OD值随时间衰减)89;

  • ‌干扰排除‌:溶血样本(血红蛋白>0.5 g/dL)需弃用,脂血样本需10,000×g高速离心净化89;

  • ‌标准曲线‌:每板需设置空白孔及梯度标准品(0–2000 pg/mL)89。


‌三、注意事项‌

  • ‌科研专用限制‌:仅限体外研究,不可用于临床诊断28;

  • ‌物种交叉性‌:绵羊靶向抗体可能与鼠/人Hepcidin存在弱交叉反应(需预实验验证)69;

  • ‌样本时效性‌:组织匀浆制备后需立即检测,室温放置>30分钟可致抗原降解>20%8;

  • ‌质量控制‌:批内CV<8%,批间CV<10%(需设低、中、高值质控样本)910。


‌四、操作流程精要‌

textCopy Code1. 样本预处理:血清/血浆离心 → 组织匀浆后取上清  
2. 加样孵育:50μL样本/标准品加入预包被微孔 → 37℃避光温育60分钟  
3. 洗涤:洗板5次,每次浸泡30秒  
4. 信号放大:依次加入生物素二抗→HRP-链霉亲和素→TMB显色→终止液  
5. 读值:450 nm测定OD值,拟合标准曲线计算浓度

(依据89整合)

注:试剂开封后需密封防潮,酶标板剩余孔位需放置干燥剂保存89。



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