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绵羊细胞周期素D(Cyclin-D)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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绵羊细胞周期素D(Cyclin-D)elisa试剂盒

以下是绵羊细胞周期素D(Cyclin-D)ELISA试剂盒的核心应用与技术规范总结:


‌一、核心应用方向‌

  1. ‌细胞增殖调控研究‌

    • 定量检测血清、血浆或组织匀浆中的Cyclin-D水平,分析绵羊细胞周期G1/S期转换效率,评估组织再生或病理增生状态13;

    • 结合流式细胞术验证细胞增殖活性,辅助肿瘤模型(如肺癌)的分子机制研究67。


‌二、试剂盒技术规范‌

‌参数‌‌要求/说明‌
‌检测原理‌‌双抗体夹心法ELISA‌:包被抗Cyclin-D抗体→捕获抗原→HRP标记二抗→TMB显色定量(450 nm)12
‌检测范围‌‌未明确具体范围‌(参考同类试剂盒:0.156–10 ng/mL)78
‌灵敏度‌‌未明确‌(参考小鼠Cyclin-D2试剂盒:≤0.05 ng/mL)6
‌样本要求‌‌血清‌:无溶血,3000×g离心10分钟分离,-20℃分装(冻融≤3次)13;
‌血浆‌:EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝,3000×g离心30分钟1;
‌组织匀浆‌:1:9(重量/体积)生理盐水匀浆,3000×g离心10分钟13

‌操作关键点‌:

  • ‌温育流程‌:样本→标准品→HRP标记抗体,需彻底洗涤避免非特异性结合13;

  • ‌显色控制‌:TMB显色后酸化转黄色,15分钟内完成450 nm读数12;

  • ‌干扰排除‌:溶血样本(血红蛋白>0.5 g/dL)弃用,脂血样本需高速离心脱脂16。


‌三、注意事项‌

  • ‌试剂保存‌:未开封试剂盒需‌2–8℃避光‌,复溶试剂限当日使用13;

  • ‌样本时效‌:组织匀浆制备后需立即检测,室温放置>30分钟致抗原降解1;

  • ‌临床限制‌:‌仅限科研用途‌,不可用于疾病诊断23;

  • ‌物种特异性‌:绵羊特异性抗体包被,但与人/鼠Cyclin-D1可能存在弱交叉反应(未验证)47。


‌四、操作流程精简版‌

textCopy Code1. 样本预处理:血清/血浆离心→组织匀浆→分装冻存  
2. 加样:50μL样本/标准品→包被抗体微孔  
3. 孵育:37℃避光温育60分钟→洗板5次  
4. 显色:加HRP二抗→TMB显色→终止→450 nm读值

(依据12整合)

注:每板需设空白孔(生理盐水)、阴性对照(健康绵羊血清)及标准品梯度35。



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