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大鼠亮氨酸丰富重复激酶2(LRRK2)elisa试剂盒

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大鼠亮氨酸丰富重复激酶2(LRRK2)elisa试剂盒

大鼠亮氨酸丰富重复激酶2(LRRK2)ELISA试剂盒通过双抗体夹心法⁠510定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞裂解液中的LRRK2蛋白含量(典型检测范围 ‌0.313–20 ng/mL‌⁠1013),在神经退行性疾病机制研究、药物开发及跨系统疾病模型中具有以下核心应用与技术规范:


🔬 ‌一、核心应用方向‌

  1. ‌帕金森病(PD)机制与模型评价‌

    • ‌神经元损伤标志物‌:LRRK2激酶活性异常升高(突变型或野生型过度激活)可诱导多巴胺神经元自噬障碍与α-突触核蛋白累积⁠1516,试剂盒量化脑组织LRRK2水平可评估病理进程⁠1617;

    • ‌药效评价工具‌:检测LRRK2抑制剂(如PF-360)或降解剂(如PROTAC分子ARV-102)干预后靶蛋白水平变化,量化药物对激酶活性的抑制效率⁠1417;

  2. ‌神经炎症与免疫调控研究‌

    • ‌胶质细胞活化关联分析‌:LPS诱导的神经炎症模型中,小胶质细胞LRRK2表达上调与TNF-α释放正相关⁠716;

    • ‌免疫-神经交叉对话‌:联合检测血清LRRK2与淋巴细胞活化标志(如CD69),解析外周免疫激活对中枢神经系统的调控途径⁠18;

  3. ‌跨系统疾病模型拓展‌

    • ‌心肌修复机制‌:心肌梗死模型中LRRK2缺失通过p53/HMGB1通路减轻心脏纤维化⁠20;

    • ‌肠道炎症评估‌:克罗恩病模型肠组织LRRK2异常表达与免疫细胞浸润程度关联⁠17;


⚙️ ‌二、技术规范与操作要点‌

‌参数‌‌要求‌‌关键注意事项‌
‌检测原理‌双抗体夹心法(HRP标记二抗或生物素-链霉亲和素系统)⁠510TMB显色,OD450nm读数⁠510
‌样本处理‌‌血清/血浆‌:EDTA/柠檬酸盐抗凝(‌禁用肝素‌⁠25),3000×g离心10min;
‌组织匀浆‌:含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液(推荐添加1mM DTT)⁠510
反复冻融≤3次;脑组织需速冻后匀浆⁠1012
‌功能验证‌需联合Western Blot(蛋白特异性)或激酶活性检测⁠714试剂盒仅定量总蛋白,需补充磷酸化位点分析⁠1617

💎 ‌三、典型科研模型设计‌

‌研究方向‌‌模型示例‌‌联合检测指标‌
‌帕金森病理机制‌6-OHDA诱导PD大鼠模型⁠16黑质LRRK2↑ + α-synuclein磷酸化↑ + 多巴胺神经元丢失⁠1617
‌心肌损伤修复‌冠状动脉结扎心肌梗死模型⁠20心脏组织LRRK2↓ + p53/HMGB1通路活性↓ + 纤维化面积↓⁠20
‌LRRK2抑制剂评价‌LRRK2 G2019S转基因大鼠模型⁠14脑脊液LRRK2↓ + Rab10磷酸化↓ + 溶酶体功能恢复⁠1417

️ ‌四、注意事项‌

  1. ‌生物学意义验证局限‌:

    • LRRK2需检测其激酶结构域磷酸化(如Ser1292、Rab10底物)以确认功能活性,单纯蛋白定量可能误导结论⁠1516;

  2. ‌样本时效性要求‌:

    • LRRK2易降解,组织分离后需液氮速冻,-80℃保存(避免冻融)⁠1012;

  3. ‌交叉反应风险‌:

    • 抗体可能识别LRRK2剪切变体或其他丝氨酸激酶,需WB验证条带特异性⁠1319;

  4. ‌应用限制声明‌:

    • ‌仅限科研使用‌⁠15,临床诊断需经认证试剂⁠46;


📌 ‌总结‌

该试剂盒适用于:

  • ‌神经退行性疾病机制‌(帕金森病⁠1516、阿尔茨海默病中LRRK2介导的tau蛋白病理⁠18);

  • ‌治疗策略开发‌(激酶抑制剂效价⁠1417及PROTAC降解剂评价⁠14);

  • ‌跨系统功能研究‌(心肌修复⁠20、肠道炎症⁠17及免疫-神经交互作用⁠718)。
    操作需严格:避免肝素抗凝⁠210,联合磷酸化检测或病理染色验证功能相关性⁠1617。

‌注‌:LRRK2数据需结合突变类型(如G2019S⁠17)、下游通路(Rab GTPase活性⁠16)及神经元/胶质细胞共标记分析⁠718综合解读其在疾病中的调控网络。


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