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大鼠皮质类固醇11β脱氢同工酶1（HSD11B1）elisa试剂盒 |
大鼠皮质类固醇11β脱氢同工酶1（HSD11B1）ELISA试剂盒在科研中的核心应用与技术要点如下：
检测目标：
特异性定量大鼠HSD11B1蛋白浓度，典型检测范围为 156.25–5000 pg/mL（部分试剂盒 1.563–100 ng/mL），灵敏度达 0.094–0.938 ng/mL13；
基于双抗体夹心法原理，通过测定OD450值计算浓度14。
适用样本：
血清、血浆、组织匀浆液（肝脏/脂肪组织为主）、细胞培养上清液、细胞裂解液13；
溶血/高脂样本需3000 rpm离心20分钟去除干扰物48。
肥胖与胰岛素抵抗：定量脂肪组织中HSD11B1表达升高（如高脂饮食模型），揭示其通过增加局部活性皮质醇水平，促进脂质积累和胰岛素信号通路抑制1012；
非酒精性脂肪肝（NAFLD）：检测肝脏HSD11B1活性与脂质氧化通路（如β氧化）的负相关性，关联肝细胞脂肪变性进程10。
组织特异性糖皮质激素代谢：在脑、肝脏等组织中分析HSD11B1将无活性皮质酮转化为活性皮质醇的效率，探究其对HPA轴负反馈调节的影响1013。
抑制剂药效评估：检测11β-HSD1选择性抑制剂（如羧甲基烯烃类化合物）干预后HSD11B1活性抑制率，评估改善糖耐量及胰岛素敏感性的效果12。
方法学要点：
预包被抗体捕获HSD11B1，HRP标记二抗催化TMB显色，显色需严格避光（≤15分钟），终止后30分钟内检测OD450值14；
冻干标准品需复溶后梯度稀释建立标准曲线（如1000 pg/mL起始浓度）46。
样本前处理：
组织匀浆：生理盐水稀释后1000×g离心10分钟取上清38；
保存条件：-70℃分装保存，避免反复冻融，长期储存需添加蛋白酶抑制剂49。
干扰规避：
NaN₃禁用（抑制HRP活性）；高胆红素样本需超速离心预处理47。
该试剂盒是研究代谢性疾病（肥胖、脂肪肝）、糖皮质激素局部活化及靶向药物开发的核心工具1012。操作中需优化离心去干扰步骤，重点关注HSD11B1通过增加组织活性皮质醇水平促进代谢紊乱的病理机制1012。
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