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大鼠皮质抑素(CST)elisa试剂盒 |
大鼠皮质抑素(CST)ELISA试剂盒在科研领域的核心应用及技术要点如下:
检测目标:
特异性定量大鼠CST蛋白浓度,典型检测范围为 0.156–10 ng/mL,灵敏度达 0.079 ng/mL10;
采用双抗体夹心法原理,通过酶标仪测定OD450值计算浓度45。
适用样本:
血清、血浆、组织匀浆液(主动脉为主)、脑脊液、细胞培养上清液15;
溶血/高脂样本需3000 rpm离心20分钟去除干扰物18。
动脉钙化模型:定量维生素D₃诱导的大鼠主动脉CST表达变化,揭示其通过抑制内质网应激(下调CHOP/GRP94蛋白)减轻钙沉积和骨钙素(OCN)的表达1320;
血管重塑调控:分析CST在高血压模型中调节血管平滑肌细胞表型转化的作用,关联血管壁增厚病理进程13。
垂体激素分泌研究:检测CST与生长抑素(SS)协同调控大鼠垂体瘤细胞(GH3细胞)生长激素(GH)、催乳素(PRL)分泌的剂量效应,高浓度(10⁻⁷M)促进效率达48.78%(GH)和98.71%(PRL)19。
应激反应分析:结合抑郁模型(如慢性不可预知温和应激CUMS),评估CST在海马盐皮质激素受体(MR)通路中的调控作用,关联应激性行为学改变2223。
方法学要点:
预包被抗体捕获CST蛋白,HRP标记二抗催化TMB显色,显色需严格避光(≤15分钟),终止后30分钟内检测OD值48。
样本前处理:
组织样本:生理盐水匀浆后离心(1000×g,10分钟)取上清48;
保存条件:-70℃分装保存,禁止反复冻融48。
干扰控制:
脑脊液需验证回收率;含NaN₃样本禁用(抑制HRP活性)710。
该试剂盒是研究心血管钙化(如维生素D₃模型)、内分泌调控(垂体激素分泌)及神经应激反应(抑郁模型)的关键工具1319。应用时需优化样本前处理(如低温保存、避光显色),重点关注CST通过抑制内质网应激减轻动脉钙化、协同调节垂体激素的核心机制1319。