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大鼠葡萄糖调节蛋白78（HSPA5）elisa试剂盒 |
大鼠葡萄糖调节蛋白78（HSPA5/GRP78）ELISA试剂盒在科研领域主要用于定量检测大鼠生物样本中的HSPA5蛋白表达水平，其核心应用方向及技术要点如下：
检测目标：
特异性定量大鼠HSPA5浓度，典型检测范围 0.781–50 ng/mL，灵敏度最低达 0.27 ng/mL1213；
部分试剂盒支持酶联免疫吸附法（双抗体夹心法）定量检测38。
适用样本：
血清、血浆、组织匀浆液（肝脏/胰腺）、细胞培养上清液、脑脊液13；
溶血或高脂样本需离心预处理（3000 rpm离心20分钟）117。
量化糖尿病、肥胖模型中肝脏/胰腺组织的HSPA5表达，揭示其在未折叠蛋白反应（UPR）中的调控作用，关联胰岛素抵抗机制69；
探究肿瘤微环境中HSPA5高表达与癌细胞耐药性、生存能力的相关性56。
评估内质网应激调节剂（如牛磺熊去氧胆酸）干预后HSPA5水平变化，验证药物对UPR通路的抑制效应910。
检测脑缺血或神经退行性疾病模型中脑脊液HSPA5动态变化，分析其作为神经保护性分子伴侣的应答机制68。
作为内质网应激标志物，辅助验证基因编辑大鼠模型（如HSPA5敲除/过表达）的分子表型710。
方法学原理：
双抗体夹心法：预包被抗大鼠HSPA5抗体捕获目标蛋白，HRP标记二抗催化TMB显色，浓度与OD450值正相关38。
关键操作要求：
组织样本需生理盐水匀浆后离心（1000×g离心10分钟）取上清814；
避免反复冻融，推荐-70℃分装保存38。
样本前处理：
显色控制：TMB避光孵育≤15分钟，终止后30分钟内完成检测814。
性能参数：
灵敏度：最低检测限 0.27 ng/mL1213；
精密度：板内/板间变异系数 CV < 10%1214。
该试剂盒是研究内质网应激机制、代谢性疾病及肿瘤耐药性的关键工具69。其应用需规范操作流程（如低温保存、避光显色），尤其在评估UPR通路激活时，可为HSPA5介导的细胞应激保护效应提供精准分子证据1011。
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