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大鼠趋化因子C-C-基元受体6(CCR6)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠趋化因子C-C-基元受体6(CCR6)elisa试剂盒

🔬 ‌一、核心应用方向‌

1. ‌自身免疫性疾病机制‌

  • ‌类风湿性关节炎‌:滑膜组织中CCR6表达量升高(≥8.5 pg/mL),驱动Th17细胞浸润,与关节损伤评分呈正相关(r≥0.75)919;

  • ‌抗体介导的排斥反应‌:肾移植模型外周血CCR6浓度动态升高(>5 pg/mL),标志供者特异性抗体(DSA)生成及Tfh-B细胞异常活化1019。

2. ‌炎症性呼吸疾病研究‌

  • ‌慢性阻塞性肺病(COPD)‌:支气管肺泡灌洗液(BALF)中CCR6浓度显著升高(105.81±2.73 ng/L↑),介导未成熟树突细胞(iDC)向炎症灶迁移1217;

  • ‌哮喘模型‌:烟草烟雾暴露使气道CCR6 mRNA及蛋白表达上调40%,促进中性粒细胞浸润及气道高反应性15。

3. ‌肿瘤微环境调控‌

  • ‌消化系统肿瘤‌:CCR6-CCL20轴招募CCR6⁺Treg细胞形成免疫抑制微环境,促进结直肠癌血管生成(需验证抗体交叉反应性)813;

  • ‌淋巴瘤靶向‌:B细胞淋巴瘤组织中CCR6≥15 pg/mL时,协同CXCL13驱动恶性B细胞增殖811。


🧪 ‌二、技术操作规范‌

‌检测系统核心参数‌

‌参数‌‌要求‌
‌检测原理‌双抗体夹心法(预包被抗CCR6单抗 → HRP标记二抗 → TMB显色)12
‌检测范围‌‌2.5–80 pg/mL‌(血清/血浆)或 ‌12.5–400 pg/mL‌(组织匀浆)14
‌灵敏度‌‌≤2.5 pg/mL‌(可检测低丰度受体表达)36
‌重复性‌板内CV<8%,板间CV<10%(需复孔校准)34

‌关键操作要点‌

  • ✅ ‌样本预处理‌:

    • ‌血清/血浆‌:EDTA或柠檬酸盐抗凝,‌3000×g离心15分钟‌,避免反复冻融(降解率<8%)12;

    • ‌组织匀浆‌:按 ‌1:9(w/v)‌ 加入含蛋白酶抑制剂的PBS,超声破碎后‌12000×g离心20分钟‌49;

  • ❌ ‌干扰规避‌:

  • 禁用肝素抗凝血浆(干扰抗原-抗体结合)24;

  • 溶血样本需超滤(Hb<0.5 mg/mL),脂血样本需>12000×g超速离心46;

  • ⏱️ ‌时效控制‌:TMB显色终止后‌10分钟内‌完成450 nm读数(OD值衰减速率>0.015/min)34。


📊 ‌三、典型病理浓度参考‌

‌模型‌‌样本类型‌‌CCR6浓度‌‌生物学意义‌
‌生理状态‌血清0.5–5.2 pg/mL基础免疫稳态417
‌活动性COPD‌BALF≥105 ng/LiDC浸润阈值12
‌B细胞淋巴瘤‌肿瘤组织≥15 pg/mL恶性增殖标志811

‌CCL20-CCR6信号通路机制‌

mermaidCopy Codegraph LR
A[炎症/肿瘤刺激] --> B[分泌CCL20]
B --> C[结合CCR6受体]
C --> D[招募Th17/Treg/iDC]
D --> E[形成免疫抑制微环境 → 组织损伤/肿瘤进展]

‌注‌:需联合检测CCL20浓度及下游因子(如IL-17、IL-23)813


⚠️ ‌应用局限与对策‌

‌局限‌‌解决方案‌
‌种属交叉反应风险‌避免用于人源样本(抗体针对大鼠CCR6设计)311
‌组织异质性影响‌优先选取炎症灶边缘或肿瘤浸润区(表达量较中心高30-40%)813
‌动态范围限制‌超高浓度样本(如淋巴瘤)预稀释至1:50–1:20046

‌术语说明‌:CCR6(CD196)属CC类趋化因子受体,通过结合CCL20调控Th17细胞、Treg细胞及树突细胞迁移,参与自身免疫疾病及肿瘤免疫逃逸817。


‌角标说明‌:检测原理12,炎症机制1215,肿瘤应用811,操作规范34。


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