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大鼠脂肪酸转位酶(FAT;CD36)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠脂肪酸转位酶(FAT;CD36)elisa试剂盒

🔬 ‌检测原理与性能参数‌

  1. ‌双抗体夹心法‌
    预包被抗大鼠FAT/CD36抗体捕获样本抗原,加入HRP标记二抗催化TMB显色,通过450nm吸光度(OD值)定量分析浓度13。

    • 常规范围: ‌0.25–8 ng/mL‌(梵态生物、化邦生物)19

    • 扩展范围:0.156–10 ng/mL(泽叶生物)6

    • ‌灵敏度‌:0.25–8 ng/mL(主流品牌通用范围)14

    • ‌检测范围‌:

    • ‌精密度‌:板内/板间变异系数(CV)<10%16

    • ‌特异性‌:不与大鼠其他脂肪酸结合蛋白交叉反应35


🧪 ‌样本处理规范‌

‌样本类型‌‌关键操作要点‌
‌血清/血浆‌EDTA/肝素抗凝,2000–3000 rpm离心10–20分钟;溶血样本需弃用38
‌组织匀浆‌按1:9(w/v)加预冷PBS(含蛋白酶抑制剂)匀浆,5000×g离心5–10分钟取上清35
‌保存要求‌分装后-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融;检测前室温平衡38

️ ‌注意事项‌:

  • ‌NaN₃显著抑制HRP活性‌,避免使用含NaN₃防腐剂的样本15

  • 高脂样本需超速离心预处理8


️ ‌操作流程要点‌

  1. ‌试剂保存‌

    • 未开封试剂盒:‌2–8℃避光保存‌(有效期6个月),TMB显色液严格避光14

  2. ‌标准化步骤‌

    • 孵育条件:37℃恒温60–90分钟(不同品牌略有差异)38

    • 洗涤要求:≥5次,每孔注满洗涤液以减少背景干扰38

  3. ‌结果计算‌

    • 绘制7点标准曲线(1:2梯度稀释),样本与标准品需设双复孔38



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