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大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶2(ELA2)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶2(ELA2)elisa试剂盒

🔬 ‌检测原理与性能参数‌

  1. ‌双抗体夹心法‌
    预包被抗大鼠ELA2抗体捕获样本中的抗原,加入生物素化检测抗体和HRP标记链霉亲和素复合物,催化TMB显色,通过450nm吸光度(OD值)定量分析浓度16。

    • 主流品牌:0.156–10 ng/mL(覆盖生理及病理浓度)14

    • 部分品牌:2.5–80 ng/mL(如化邦生物)10

    • ‌检测范围‌:

    • ‌灵敏度‌:0.069–4.7 ng/mL(进口品牌如Abcam可达pg级)59

    • ‌精密度‌:板内/板间变异系数(CV)<10%39

    • ‌特异性‌:与大鼠其他炎症因子无交叉反应310


🧪 ‌样本处理与保存‌

‌样本类型‌‌处理要求‌
‌血清/血浆‌EDTA/肝素抗凝,3000 rpm离心10–30分钟,避免溶血或脂血干扰116
‌组织匀浆‌PBS缓冲液匀浆后离心取上清(推荐添加蛋白酶抑制剂)1720
‌细胞上清液‌3000 rpm离心10分钟去除颗粒物110
‌保存条件‌分装后-20℃冻存,避免反复冻融;检测前室温平衡并混匀17

⚠️ ‌关键提示‌:溶血或高脂样本需预处理,含NaN₃样本会抑制HRP活性718。


⚙️ ‌操作流程要点‌

  1. ‌试剂保存‌

    • 未开封试剂盒:2–8℃避光保存(有效期6个月),TMB显色液严格避光14。

  2. ‌标准化步骤‌

    • 孵育温度:37℃恒温,时间60–90分钟(依品牌略有差异)16。

    • 洗涤要求:≥5次,每孔注满洗涤液以减少非特异结合36。

  3. ‌结果计算‌

    • 标准曲线需同步检测,建议标准品与样本均做复孔47。


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