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大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)elisa试剂盒

以下为大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA试剂盒的核心技术参数、操作规范及科研应用总结:


🔬 ‌一、核心科研应用‌

  1. ‌纤维化与肿瘤机制研究‌

    • 定量检测血清、血浆、组织匀浆及细胞裂解液中TSC22水平,解析其在TGF-β信号通路调控、纤维化疾病进展及肿瘤转移中的作用14。


⚙️ ‌二、核心技术参数‌

‌参数‌‌指标‌
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:预包被抗TSC22单抗捕获抗原,HRP标记二抗催化TMB显色14
‌检测范围‌‌0.625–20 ng/mL‌(常规)或 ‌62.5–2000 pg/mL‌(高敏试剂盒)46
‌灵敏度‌‌≤0.1 ng/mL‌(常规)或 ‌≤28.125 pg/mL‌(高敏)411
‌孵育时序‌37℃抗原捕获60分钟 → 洗涤5次 → 加酶标二抗37℃孵育30分钟 → TMB避光显色10–15分钟13

‌样本处理规范‌

‌样本类型‌‌关键步骤‌
‌血清/血浆‌EDTA/肝素抗凝,‌2000–3000×g离心15分钟‌,避免溶血或脂质残留14
‌组织匀浆‌按1:9 (w/v)加预冷PBS(含蛋白酶抑制剂),冰上匀浆后 ‌5000×g离心10分钟取上清‌34
‌细胞上清液‌‌1000–3000×g离心10分钟‌去除颗粒物89
‌保存条件‌‌-20℃分装冻存‌(长期需-80℃),反复冻融≤3次13
mermaidCopy Codegraph LR
A[样本预处理] --> B{类型}
B -->|血清/血浆| C[抗凝→离心]
B -->|组织| D[PBS匀浆→离心]
B -->|细胞上清| E[直接离心]
C & D & E --> F[稀释至线性范围]
F --> G[加样→37℃孵育60min]
G --> H[洗涤5次]
H --> I[加酶标二抗→37℃孵育30min]
I --> J[TMB避光显色10-15min]
J --> K[加终止液→450nm读值]

⚠️ ‌关键注意事项‌

  • ‌干扰控制‌:

    • ‌禁用NaN₃防腐剂‌(抑制HRP活性)18;

    • 高脂样本需 ‌10,000×g超速离心20分钟‌ 去除脂质干扰48;

  • ‌操作要点‌:

    • 显色阶段严格避光,单孔加样时间差≤10分钟39;

    • 板内变异系数需‌<10%‌(回收率85%-115%)613;

  • ‌生物学意义‌:

    • TSC22通过调控TGF-β信号通路参与细胞外基质沉积,是纤维化及肿瘤微环境研究的关键靶点1517;

  • ‌应用限制‌:

    • ‌仅限科研用途‌,临床诊断需专用验证试剂盒18。


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