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大鼠可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)ELISA试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)ELISA试剂盒

以下为大鼠可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)ELISA试剂盒的核心科研应用及操作规范总结,整合文献与技术参数:


🔬 ‌一、核心科研应用‌

  1. ‌心脏纤维化与心室重塑研究‌

    • ‌缺血性心肌病模型‌:定量检测sST2升高(显著高于假手术组),验证其通过阻断IL-33/ST2L信号通路促进心室重塑(左心室射血分数下降>20%,心肌纤维化标志物升高>30%)6;

    • ‌心衰进展评估‌:联合超声心动图分析,sST2>35 ng/mL提示心力衰竭风险显著增加(病理临界值)59。

  2. ‌炎症与损伤机制解析‌

    • ‌心肌损伤关联性‌:验证sST2与心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶(CK)正相关(r>0.85),揭示其作为心肌应激标志物的价值6;

    • ‌炎症级联调控‌:检测sST2过表达促进IL-6、TNF-α释放(增幅>40%),加剧组织炎症反应613。

  3. ‌药物干预疗效评价‌

    • ‌抑制剂开发‌:评估腺病毒载体介导的sST2过表达对心室重塑的促进作用(干预后sST2升高>2倍),为靶向治疗提供模型依据6;

    • ‌基因疗法验证‌:结合RNAi技术,分析sST2沉默对心脏保护通路的影响13。


⚙️ ‌二、检测操作规范‌

‌关键技术参数‌

‌参数‌‌指标‌
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:预包被抗sST2抗体捕获抗原,HRP标记二抗催化TMB显色114;
‌检测范围‌‌0.31–20 ng/mL‌(标准梯度:20/10/5/2.5/1.25/0.31 ng/mL)17;
‌灵敏度‌≤0.19 ng/mL,板内变异系数<10%17;
‌孵育时序‌37℃孵育60分钟 → 洗涤5次 → 加酶标二抗37℃孵育30分钟 → TMB避光显色15分钟114。

‌样本处理要求‌

‌样本类型‌‌关键步骤‌
‌血清/血浆‌EDTA或肝素抗凝,2000–3000×g离心10–15分钟,避免溶血114;
‌组织匀浆‌按1:9 (w/v)加预冷PBS冰上匀浆,5000×g离心10分钟取上清614;
‌保存条件‌‌-70℃分装冻存‌,反复冻融≤3次(浓度偏差<15%)114。
mermaidCopy Codegraph LR
A[样本预处理] --> B{类型}
B -->|血清/血浆| C[离心取上清]
B -->|组织| D[冰上匀浆→离心]
C & D --> E[稀释至线性范围]
E --> F[加入预包被板]
F --> G[37℃孵育60分钟]
G --> H[洗涤5次+加酶标二抗]
H --> I[37℃孵育30分钟]
I --> J[TMB避光显色15分钟]
J --> K[终止反应→450nm读数]

⚠️ ‌关键注意事项‌

  • ‌种属特异性‌:针对大鼠样本优化(与人源sST2交叉反应率未明确)10;

  • ‌干扰控制‌:

    • 禁用含NaN₃防腐剂样本(抑制HRP活性)114;

    • 高血脂样本需离心过滤,避免假阳性14;

  • ‌临床关联性‌:

    • ‌35 ng/mL‌为心衰风险临界值(人源数据参考,大鼠需验证)59;

  • ‌应用限制‌:‌仅限科研用途‌(临床诊断需专用试剂盒)714。

‌典型观测值参考‌:

  • 健康大鼠血清基础值:相关文献未明确报告(人源健康值<35 ng/mL)9;

  • 病理模型:

    • 缺血性心肌病模型>15 ng/mL6;

    • 肝纤维化模型>12 ng/mL13。


📝 ‌三、技术优势‌

  1. ‌高精准度‌:

    • 回收率>92%,标准曲线R²≥0.9914;

    • 可检测微量样本(最低10μL血清)14。

  2. ‌多场景适配‌:

    • 兼容血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等样本114;

    • 支持与超声心动图、炎症因子检测联动分析613。

‌注‌:终止液含0.5M H₂SO₄,操作需穿戴防护装备114。联合自噬标志物(如LC3B)检测可深入解析心肌细胞稳态机制2122。


如何操作大鼠sST2 ELISA试剂盒?


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